尊龙凯时的产品简介：

动物体内发光技术通常涉及将萤火虫荧光素酶基因稳定整合到目标细胞的染色体DNA中，从而构建出持续表达荧光素酶的细胞株。在这种情况下，细胞的增殖、迁移或分化过程会伴随着荧光素酶的稳定表达。当这些细胞被导入如小鼠等研究动物体内后，再注射底物荧光素（luciferin），便可以利用生物发光成像技术（BLI）监测光强度的变化，实时追踪疾病的发展或药物的治疗效果。

D-荧光素钾盐（D-Luciferin Potassium Salt）是荧光素酶的常用底物，能够在540-600nm的波长范围内发出蓝绿色光。在有氧环境中，荧光素在荧光素酶与Mg2+的催化下与ATP反应，形成荧光素-AMP复合体并释放焦磷酸（PPi）。接着，荧光素-AMP复合体在O2的作用下进一步转化为氧化荧光素，同时释放CO2和H2O。氧化荧光素在返回基态时会释放光子，这种发光特性使得荧光素能够更容易穿透组织，并在体内相对缓慢代谢，因此在活体成像实验中，萤火虫荧光素酶基因常被选作报告基因。

尊龙凯时的产品应用场景：

1. 体外生物发光检测

（1）D-荧光素钾盐体外实验应用

• 报告基因检测：利用D-荧光素钾盐作为底物，可以定量反映与特定目标基因融合的荧光素酶产生的生物发光强度。
• 高通量药物筛选：通过检测荧光素酶的生物发光强度，以快速筛选调控目标基因表达的化合物。
• ATP含量检测：D-荧光素钾盐通过与ATP介导的荧光素酶反应，实现对细胞内ATP水平的高灵敏度检测。
• 样品污染检测：ATP-荧光素酶生物传感系统可实现对活体生物所共有的ATP信号的实时检测，以判断生物污染情况。

（2）体外D-荧光素钾盐使用方法

1. 使用无菌蒸馏水将D-荧光素钾盐溶解，配制成30mg/mL的储存液，并立即使用或分装于-80℃避光保存（限冻融1次）。
2. 用预热的培养基将储存液稀释至工作液浓度（建议现配现用）。
3. 去除细胞培养基后，向细胞培养板添加D-荧光素钾盐工作液，37℃孵育5-10分钟，然后进行图像分析。

2. 体内活体成像

一个完整的生物发光活体成像过程包括构建荧光素酶重组质粒、细胞转染与筛选、以及荧光素酶活性鉴定等步骤。随后，将阳性克隆细胞移植到动物体内，借助小动物活体成像系统检测特定部位发出的荧光信号。

（1）体内D-荧光素钾盐使用方法

1. 配制无菌DPBS（abs970，无Mg2+、Ca2+）中的30mg/mL D-荧光素储存液，并过滤除菌。
2. 使用前将存储液解冻至室温并避免光照。
3. 进行腹腔注射（ip），按照150mg/kg的荧光素/体重比例注射。
4. 待注射后10-15分钟，进行光信号成像分析，并建立荧光素酶动力学曲线以确定最佳信号检测时间。

（2）体内活体成像验证数据

尊龙凯时's D-荧光素钾盐与知名进口品牌的发光强度对比，无显著性差异，验证了其优越的性能和一致性。

3. 常见问题解答

1. 荧光素酶底物有哪些？如何选择？

D-荧光素、D-荧光素钾盐和D-荧光素钠盐是常见的荧光素酶底物，其主要区别在于溶解性能。D-荧光素钾盐因在水和缓冲液中的高溶解度而被广泛采用。

2. D-荧光素钾盐如何保存？

• 最佳保存条件为-80℃避光存储，有效期12个月。
• 复溶后的储备液需避光冻存且仅限冻融1次。
• 工作液推荐现配现用以确保最佳效果。

3. 体外细胞实验中需要破坏细胞吗？

通常，D-荧光素钾盐在体外细胞实验中无需对细胞进行裂解，因其优良的穿透性。但若需准确定量荧光素酶活性或ATP水平，则需破坏细胞释放酶以实现定量分析。

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