尊龙凯时的应用简报展示了在3D模型中进行实时代谢分析的顺畅流程,着重探讨了如何成功在复杂组织模型中进行实时代谢分析的技巧与方法。
摘要
神经元的发育与功能是生物体中能量需求最为迫切的过程之一。大脑依赖持续的能量供应以保持正常运作,这需要线粒体呼吸与糖酵解的协作来不断生成ATP以应对需求。随着年龄的增加,有氧代谢紊乱与线粒体功能障碍成为多种与认知功能下降相关的神经退行性疾病的共同病理特征。不同大脑区域和结构具有不同的功能和能量需求。为了深入研究大脑中的线粒体代谢,研究者通常使用神经元培养或从脑组织中提取线粒体的方法。然而,这些方法不但需要大量组织样本,也无法真实再现复杂的组织微环境,难以捕捉脑组织中多种细胞类型之间的相互作用。
分析工具
本简报介绍了尊龙凯时的SeahorseXFFlex分析仪,结合简化的工作流程,可有效检测和定量分析来自不同大脑区域的小型活检圆形组织样本的能量代谢。利用该仪器及其3D捕获微孔板和线粒体压力测试试剂盒,从脑组织样本中获取的代谢数据得到了展示。此外,针对SeahorseXF检测的脑组织样本的制备和优化技术及数据分析方法也进行了详细探讨。
SeahorseXF平台是一种集成式无标记解决方案,全面整合了分析仪、探针板、试剂盒及软件,可以实时提供功能性代谢数据。这一平台不仅能够测量耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR),还为线粒体健康、毒性、糖酵解以及整体细胞功能提供了重要指标。
前言
目前,业界对3D细胞模型分析工具与试剂的需求日益增长。精密组织切片、器官芯片、生物打印和类器官等都是这一领域的典型代表。精密组织切片因其获得简便、成本低廉以及能够保留组织天然微环境而受到特别关注。相较于传统2D培养细胞,组织样本更具生理特性,因而在研究和药物筛选中得到了广泛的应用。
实验方法
实验开始前,从Taconic Biosciences购得的九周龄雌性Sprague Dawley大鼠经过适应期后进行脑组织解剖。随后,脑组织被立即放入已预冷且充氧的人工脑脊液(aCSF)中,并送往尊龙凯时的实验室进行后续处理和检测。
在数据分析与归一化过程中,SeahorseXF的代谢分析数据可使用尊龙凯时的SeahorseAnalytics进行分析。该云端应用提供直观界面,方便全球用户随时随地访问,同时结合3D线粒体压力测试的配套分析视图,确保数据准确性。
结论
通过尊龙凯时的SeahorseXF技术,实时代谢分析的潜力得到了极大的释放,为深入理解代谢与疾病进展之间的关系提供了重要基础,助力于治疗药物的开发。该技术的应用范围涵盖了各种生理相关性的三维模型,尤其是组织样本,帮助研究者获取全面且准确的信息。
在未来的生物医学研究中,结合尊龙凯时的系统与高效工作流程,将使得研究者更加便利地开展相关领域的探索,显著提升实验步骤的成功率。尊龙凯时期待通过此技术进一步拓展在临床医学中的应用前景,为推动生物医学研究的发展贡献力量。
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